為應(yīng)對(duì)SARS-CoV-2大流行，由脂質(zhì)納米顆粒（LNP）包裹mRNA制得的新冠疫苗率先投入使用。由于mRNA自身的不穩(wěn)定性，鑒定可能影響產(chǎn)品穩(wěn)定性和功能的雜質(zhì)對(duì)于長(zhǎng)期開發(fā)及使用基于核酸的藥物至關(guān)重要。文獻(xiàn)采用了反相離子對(duì)高效液相色譜（RP-IP HPLC）對(duì)脂質(zhì)與mRNA反應(yīng)形成的一類雜質(zhì)進(jìn)行了鑒定；傳統(tǒng)的mRNA純度分析技術(shù)通常無(wú)法檢測(cè)到這種反應(yīng)。鑒定出的脂質(zhì)修飾使mRNA無(wú)法翻譯，導(dǎo)致蛋白質(zhì)表達(dá)喪失。具體而言，來(lái)自可電離陽(yáng)離子脂質(zhì)的帶電頭部被證明是有影響的。與雜質(zhì)形成有關(guān)的機(jī)制包括：叔胺的氧化及隨后的水解。因此，確保穩(wěn)健的分析方法和嚴(yán)格的生產(chǎn)控制，確保LNP遞送系統(tǒng)中mRNA的穩(wěn)定性和高活性對(duì)于核酸藥物及疫苗開發(fā)至關(guān)重要。

· 鑒定出的脂質(zhì)修飾使mRNA無(wú)法翻譯，導(dǎo)致蛋白質(zhì)表達(dá)喪失。具體而言，來(lái)自可電離陽(yáng)離子脂質(zhì)的帶電頭部被證明是有影響的。

· LNP技術(shù)是mRNA遞送到組織的有效遞送手段，但儲(chǔ)存過(guò)程中，某些化學(xué)官能團(tuán)的相互作用（如氧化、水解或酯交換）會(huì)將mRNA骨架切割成更小的片段，進(jìn)而導(dǎo)致mRNA降解。

· 盡管在低分子量RNA產(chǎn)物（如小干擾RNA（siRNA））中使用了類似的脂質(zhì)系統(tǒng)，但由于加合物形成的隨機(jī)性質(zhì)，在mRNA系統(tǒng)中觀察到的相同摩爾反應(yīng)速率將導(dǎo)致siRNA在完整質(zhì)量基礎(chǔ)上形成水平較低。

· 這些研究表明，即使在相對(duì)溫和的酸性條件下，N-氧化物水解也可以在不使用金屬催化劑的情況下生成仲胺和醛。進(jìn)一步的分析表明，N-氧化物的存在導(dǎo)致高水平的LP（a late eluting-peak），在二元系統(tǒng)中mRNA在3天內(nèi)幾乎完全轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)P（圖5d）。

· 即使在冷藏條件下，在疫苗生產(chǎn)過(guò)程中引入雜質(zhì)也可能影響疫苗的穩(wěn)定性。

 在LNP配制的核酸產(chǎn)品的研究、開發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中監(jiān)測(cè)和控制脂質(zhì)加合物的形成仍然至關(guān)重要。